Как у собак развивается нейтропения

1 Какова морфология нейтрофилов у животных?

Нейтрофилы приматов (включая человека) более явно окрашены специальными частицами, а цитоплазма бычьих нейтрофилов имеет розовый цвет, поскольку содержит крупные третичные частицы. Ядра нейтрофилов глубоко окрашены, плотные и разделены на 3-5 долей. На мазках крови нейтрофилы немного меньше, чем эозинофилы и базофилы.



Барабанные тельца - это маленькие, круглые ядерные дольки, которые соединены с ядром нейтрофилов тонкой нитью. Обычно оно встречается в небольшом количестве нейтрофилов у женщин и представляет собой инактивированную вторую Х-хромосому. Его структура похожа на структуру палочковидных везикул в эпителиальных клетках самок. Если палочковидные везикулы присутствуют в большом количестве нейтрофилов у самцов, это указывает на хромосомные нарушения, например, синдром XXY у самцов плавунчиков.

3 Какова основная функция нейтрофилов

При остром воспалении нейтрофилы, содержащиеся в крови, должны проникнуть в ткани и действовать как клетки передней линии атаки. В месте воспаления происходит выброс таких хемокинов, как интерлейкин-8 (IL-8) и комплемент (C5a), что приводит к скоплению нейтрофилов. Их основная роль заключается в фагоцитозе и уничтожении бактерий. Нейтрофилы используют ряд методов для атаки бактерий в фагосоме, включая образование кислородных радикалов, таких как супероксид-анион и перекись водорода, и реакцию между пероксидазой и перекисью водорода в нейтрофилах с образованием хлорноватистой кислоты. В целом, эти кислородные радикалы и другие оксиды повреждают липидные мембраны клеток-мишеней. Кроме того, нейтрофилы выделяют белки с антимикробной активностью, такие как дефенсины и лизоцим.

4 Каков процесс выработки нейтрофилов

Костный мозг производит гранулоциты и моноциты, которые происходят из общей стволовой клетки. В ответ на факторы стволовых клеток и интерлейкин-6 (IL-6) плюрипотентные стволовые клетки пролиферируют и дифференцируются в линейно-специфические прогениторные клетки, которые могут дифференцироваться в нейтрофилы, моноциты, эозинофилы или базофилы. Прогениторные клетки далее дифференцируются в клетки-предшественники, которые можно увидеть в мазках костного мозга. Ранние предшественники гранулоцитарных лейкоцитов (примитивные, ранние и промежуточные гранулоциты) проходят пять митотических делений и подвергаются изменению формы ядра (круглое - зубчатое - лопастное), постепенной конденсации ядерного хроматина и появлению аспленофильных или специализированных гранул в цитоплазме по мере их дифференциации в зрелые гранулоциты. У здоровых животных одна миелоидная клетка путем репликации за 6 дней образует 16 или 32 зрелых лобулированных нейтрофилов. Напротив, во время воспалительной фазы это время созревания сокращается, чтобы увеличить количество нейтрофилов, переносимых в ткани.

5 Что такое колониестимулирующий фактор

Колониестимулирующий фактор (КСФ) - это кластер гликопротеинов, который стимулирует выработку нейтрофилов и моноцитов костным мозгом. CSF) и макрофагальный колониестимулирующий фактор (M-CSF). Эти цитокины предотвращают апоптоз предшественников нейтрофилов и моноцитов, и этот апоптотический механизм предназначен для нормального ограничения количества зрелых клеток в костном мозге. Поскольку CSF продлевает срок жизни предшественников, это приводит к увеличению количества нейтрофилов и моноцитов в крови. Кроме того, CSF повышает функциональную активность зрелых нейтрофилов и моноцитов.

6 Как определить различные фракции нейтрофилов в крови и костном мозге

a. Циркулирующий пул. Кровь, текущая в кровеносных сосудах, содержит большое количество фракционированных нейтрофилов, и нейтрофилы в картине лейкоцитов получены из циркулирующего пула.

b. Маргинальный пул. Многие фракционированные нейтрофилы находятся в тесном контакте с эндотелиальными клетками в капиллярах и посткапиллярных микровенулах, всегда готовые к проникновению в ткань. Эти нейтрофилы не находятся в свободно текущей крови и поэтому не отражаются в лейкоцитарной картине. Циркулирующий пул и маргинальный пул имеют приблизительно равное количество нейтрофилов, за исключением кошки, маргинальный пул которой содержит в три раза больше нейтрофилов, чем циркулирующий пул.

c. Накопительный пул. Пул хранения состоит из не делящихся нейтрофилов в костном мозге, включая лобулированные нейтрофилы, палочковидные нейтрофилы и поздние ювенильные нейтрофилы. Эти клетки-предшественники будут продолжать дифференцироваться в дольчатые нейтрофилы и способны удовлетворять потребности собаки в течение нескольких дней. Накопительный пул является самым большим источником нейтрофилов.

d. Пролиферативный пул. Пролиферативный пул состоит из активно делящихся предшественников нейтрофилов в костном мозге и включает примитивные, ранние и промежуточные гранулоциты.

7. Похожи ли другие лейкоциты в костном мозге и крови на нейтрофилы? Содержат ли они также различные компоненты?

Подобно нейтрофилам, эозинофилы и моноциты крови также имеют циркулирующий пул и маргинальный пул. Однако у этих клеток нет пула хранения в костном мозге. Лимфоциты хранятся в основном в лимфоидной ткани, а не в костном мозге или крови.

8 Что такое левый ядерный сдвиг

Ядерный сдвиг влево указывает на присутствие в крови предшественников нейтрофилов, обычно в виде увеличенного количества палочкоядерных нейтрофилов, в то время как поздние ювенильные и ранние предшественники встречаются реже. Ядерный сдвиг влево происходит, когда пул крови и накопительный пул костного мозга истощаются в результате миграции большого количества фракционированных нейтрофилов к месту воспаления. В этот момент палочкоядерные нейтрофилы (и ранние предшественники) покидают костный мозг незрелыми. Хотя сдвиг левого ядра обычно вызывается бактериальной инфекцией, некоторые неинфекционные факторы, провоцирующие воспаление, также могут вызывать сдвиг левого ядра, например, некроз тканей и иммуноопосредованные заболевания.

9 Существует несколько категорий левостороннего ядерного сдвига

Если увеличивается количество как дольчатых, так и палочковидных нейтрофилов, это указывает на регенеративный левый ядерный сдвиг. Этот сдвиг является относительно благоприятным, поскольку способность костного мозга производить гранулоциты может поддерживать более высокую концентрацию дольчатых нейтрофилов во время воспаления. Четкого определения дегенеративного ядерного сдвига влево не существует. Некоторые считают, что дегенеративный ядерный сдвиг влево противоположен регенеративному ядерному сдвигу влево, при этом концентрация дольчатых нейтрофилов находится на уровне или ниже референсного диапазона и сопровождается увеличением количества палочкоядерных нейтрофилов (ранних предшественников). Другие считают, что дегенеративный ядерный сдвиг влево относится к абсолютной концентрации палочкоядерных нейтрофилов, превышающей концентрацию лобулярных нейтрофилов, что встречается редко. Несмотря на спорность определения, дегенеративный левый ядерный сдвиг вызывает большую тревогу, чем регенеративный левый ядерный сдвиг. Дегенеративный левый ядерный сдвиг обусловлен подавлением гранулопоэза и/или чрезмерной потребностью в нейтрофилах в месте воспаления, что приводит к недостаточной способности костного мозга производить гранулоциты для поддержания нормальной фракционированной концентрации нейтрофилов.

10 Что такое зрелая нейтрофилия

Лейкоцитарная картина зрелой нейтрофилии включает повышенную концентрацию фолликулированных нейтрофилов и отсутствие палочкоядерных нейтрофилов (или ранних предшественников). Такая лейкоцитарная картина может наблюдаться при различных заболеваниях, и этот результат не является специфичным без знания степени тяжести нейтрофилии. Лейкоцитарная картина зрелой нейтрофилии может быть обобщена как нейтрофилия без ядерного сдвига влево.

11 Что такое ядерный сдвиг вправо

Ядерный сдвиг вправо проявляется повышенным количеством нейтрофилов с чрезмерной ядерной лобуляцией, которая может составлять 5 и более долей. Подсчеты сортировки лейкоцитов не включают нейтрофилы с чрезмерной ядерной лобуляцией, поэтому ядерный правый сдвиг не может быть определен количественно так же, как ядерный левый сдвиг. Когда нейтрофилы циркулируют в кровотоке в течение длительного периода времени, чрезмерно лобулированные нейтрофилы часто появляются вместе со старением. Правосторонний ядерный сдвиг чаще всего возникает у животных, получающих глюкокортикоиды или страдающих гиперадренокортицизмом (особенно у собак), поскольку глюкокортикоиды подавляют миграцию нейтрофилов из кровеносных сосудов и продлевают их циркуляцию. Гиперлобуляция вследствие нарушения развития нейтрофилов встречается реже, например, при макроцитозе VIP, мальабсорбции VB12 у гигантских шнауцеров и дисплазии костного мозга у животных с миелоидным лейкозом.

12 Какова наиболее тяжелая форма нейтрофилии в картине стрессовых лейкоцитов

Концентрация фракционированных нейтрофилов в стрессовой лейкограмме имеет тенденцию к увеличению до двух-трехкратного превышения верхней границы референсного диапазона. Например, при эндогенных или экзогенных глюкокортикоидах концентрация фракционированных нейтрофилов у собак может достигать 35 000 нейтрофилов/мл. Многие воспалительные лейкоцитозы со зрелой нейтрофилией напоминают стрессовый лейкоцитоз, и их трудно выявить без сбора анамнеза и клинического обследования.

13 Каковы основные механизмы, вызывающие нейтропению

a. Избыточная миграция нейтрофилов в ткани во время воспаления (острая бактериальная инфекция, сепсис, некроз)

b. Вызванная эндотоксином маргинализация (перемещение нейтрофилов из циркулирующего пула в маргинальный пул)

c. Снижение выработки гранулоцитов костным мозгом

(1) Вирусы (вирус кошачьей лейкемии, вирус иммунодефицита кошек, микровирусы)

(2) Интрамедуллярная клеточная инфильтрация (подавление костного мозга, например, лимфосаркома, миелофиброз, саркоидоз)

(3) Токсины (токсичность собачьего эстрогена и сульфадиазина)

(4) Наследственность (взрослые бельгийские танбиры, серые колли с периодическим кроветворением)

d. Повышенное разрушение нейтрофилов (иммуноопосредованная нейтропения)

14 Почему эндотоксемия вызывает нейтропению

Одним из системных эффектов эндотоксина является усиление адгезии нейтрофилов крови к поверхности эндотелия путем активации молекул адгезии, что приводит к перераспределению нейтрофилов в крови, т.е. из циркулирующего пула в лимбический пул, и проявляется в виде тяжелой нейтропении. Хотя нейтрофилы маргинального пула остаются в крови, они не появляются на лейкоцитарной картине, это изменение известно как псевдогранулоцитопения. Последняя является лишь острым, временным изменением, за которым следует нейтрофилия, обусловленная способностью эндотоксина способствовать высвобождению нейтрофилов из накопительного пула костного мозга.

15 Почему микровирусная инфекция вызывает тяжелую лейкопению

Клетки-мишени собачьих и кошачьих микровирусов - это клетки, находящиеся в стадии быстрого митоза, включая гемопоэтические клетки-предшественники. Короткий период полураспада нейтрофилов и нарушение выработки гранулоцитов приводят к быстрому истощению нейтрофилов в крови и костном мозге. Кроме того, нейтропения усугубляется некротическим отслоением ворсинчатого эпителия кишечника вследствие вирусной атаки на клетки кишечных желез, что приводит к повышенному всасыванию эндотоксинов в кишечнике. Типичными гематологическими изменениями при микровирусной инфекции являются нейтропения без тромбоцитопении или анемии.

16 Какие два механизма вызывают нейтрофилию

a. Де-маргинация нейтрофилов крови и/или высвобождение пула костного мозга

(1) глюкокортикоиды (прием, гиперадренокортицизм)

(2) адреналина (тревога, физическая нагрузка)

b повышенная выработка гранулоцитов и высвобождение резервуаров костного мозга

(1) Воспалительные заболевания: инфекционные (бактериальные, грибковые, брюшнотифозные); неинфекционные (иммуноопосредованные, некроз, гемолиз)

(2) Паранеопластические (опухоли, продуцирующие ЦСЖ)

(3) Острый или хронический гранулоцитарный лейкоз

17 В каких тканях развивается воспаление без признаков воспалительных лейкоцитов

Нейтрофильное воспаление в мочевом пузыре, кишечнике, эпидермисе и центральной нервной системе обычно не вызывает значительных изменений в лейкоцитарной картине. Это объясняется тем, что в этих местах отсутствует защита от медиаторов воспаления (например, ЦСЖ) или тканевая изоляция. Поэтому отсутствует системный воспалительный ответ в гранулопоэзе и лейкоцитарной картине.